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本生闡述:使用PCR板需要注意那些細(xì)節(jié)
PCR(聚合酶鏈反應(yīng))板是分子生物學(xué)中常用的實(shí)驗(yàn)器材之一,用于放置PCR反應(yīng)體系及每個(gè)PCR管的反應(yīng)物。在進(jìn)行PCR實(shí)驗(yàn)時(shí),使用PCR板可以使實(shí)驗(yàn)更加高效、準(zhǔn)確、穩(wěn)定。下面是一些PCR板使用時(shí)需要注意的事項(xiàng)。
1、選擇適合的板:有許多類型的PCR板,如96孔PCR板和384孔PCR板等。需要選擇根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求選擇合適的板。需要注意的其它因素如板材質(zhì)、生產(chǎn)廠家等也需要考慮。
2、避免交叉污染:PCR板是用來放置PCR反應(yīng)物的,所以細(xì)菌,真菌等其他微生物等不能進(jìn)入PCR板。在使用前,需要嚴(yán)格消毒和清洗,防止污染,同時(shí),與其他實(shí)驗(yàn)用品分開存儲(chǔ),避免交叉污染。
3、注意在PCR板中加入反應(yīng)體系的操作:在添加PCR反應(yīng)體系時(shí),需要使用無菌、非熱應(yīng)力的卡盤和移液器。需要注意的是,不要加入過多的反應(yīng)液,否則可能會(huì)影響反應(yīng)的結(jié)果。
4、設(shè)定PCR程序時(shí)的容量:在進(jìn)行PCR實(shí)驗(yàn)之前,需要確保PCR板容量與PCR程序容量相匹配。如果反應(yīng)物的大小超過了PCR板的容量,反應(yīng)物可能溢出或?qū)е翽CR反應(yīng)失效。
5、避免PCR板過熱:在PCR反應(yīng)時(shí),需要避免PCR板過熱,可以在PCR反應(yīng)前預(yù)熱PCR板,避免漏反應(yīng)等問題的產(chǎn)生。此外,還需要注意,如果較長時(shí)間反應(yīng)會(huì)導(dǎo)致PCR板過度加熱,從而引起反應(yīng)失效。
6、按照正確的順序存儲(chǔ):在進(jìn)行PCR實(shí)驗(yàn)之后,需要將PCR板安全地存放在一個(gè)干燥且無菌的容器中,避免板的破壞和實(shí)驗(yàn)系的污染。
綜上所述,PCR板是PCR實(shí)驗(yàn)中重要的器材之一,使用PCR板時(shí)需要留意上述注意事項(xiàng)以確保實(shí)驗(yàn)的理想結(jié)果。同時(shí),需要在操作前檢查和清潔PCR板,加入反應(yīng)體系時(shí)注意反應(yīng)物液量,以滿足實(shí)驗(yàn)的要求。
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